在精确度方面优艾设计网_Photoshop问答第三代测序已经很高了,但目前国内生物实验室的测序还是以二代为主,推测成本可能是主要原因(维基百科:二代Illumina $0.05-0.15 per 1 million bases,三代$0.33-$1.00per 1 million bases),所以暂不考虑其他因素,想知道这样的成本是什么原因呢?
杨剑渝 2021-05-02 16:02 优艾设计网_在线设计
先纠正一个观点,基于单分子的高通量测序错误率很高。PacBio是最被看好的平台之一,但是测序过程中也会引入大量假的小片段插入或者缺失。
回答题主关于成本的问题。由于实验原理的差别,Illumina每一次测序能产出比其他平台多很多的数据,所以价格低廉。对比PacBio,Illumina相当于用一块CCD拍flowcell上几百万个荧光点的静态照片,PacBio是实时监控单个DNA聚合酶每一次反应,技术难度相差很大。
选择测序平台成本不是唯一的重点。测序时间(包括样本处理和数据分析的)时间,准确度,测序长度,数据量,每次测序成本和平台价格,甚至售后服务都是需要考虑的对象。综合起来,Illumina做的最好,所以现在基本垄断了市场。最主要原因是通量低,二代测序一次几十Gb数据量,三代测序(以pacbio为例)一次仅300Mb,而单次运行的成本基本上在一个量级。所以单碱基成本差了百倍。
如果通量能保证,那错误率高不是问题,每个分子都多测几次总能相互校正过来的,但这个前提是需要牺牲通量。pacbio如果想要将准确率提升到二代测序平台的水品,那么通量将进一步降低至原来的五分之一以下。
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