请教各位有经验的大神:
本人有计划在春节期间对全家系进行采血和DNA提取,以备日后全基因组测序之需。由于是私人行为,所以有些地方比医院和研究机构操作起来麻烦一些。全家人分散于各处,可优艾设计网_设计模板能无法在一天内聚集齐,所以大概是第1到第n天开车到处跑去抽血,然后第n+1天借一个实验室把DNA一起提了。因此有以下问题向各位精通样本处理的前辈请教:
应该采用何种耗材储存血液?普通的EDTA抗凝管可否或有更好选项?抽血完毕后应如何保存?暂时密封起来放在冰箱里(4度or-20?自己家的冰箱里放血样有点怪怪的)比较好还是尽量送到有-80度冰箱的地方冻起来?取样时找个冰盒放点冰袋插着是ok的吧?冻、融会有多大程度影响?直接冻比较好还是可以用甘油?不同状态的血样(新鲜的、冻过的)处理起来有否区别(比如建议使用不同的试剂盒)?求推荐试剂盒。不同状态、新鲜程度的血样提取的DNA的质量、测序质量会有多大程度的差异?血液常温保存以及低温保存,对于以全基因组测序为目的的DNA提取,建议天数分别不要超过多少?
感谢回复。如果在天津可以提供关于采血和实验室方便的帮助也请给我发个邮件 imsskk at gmail。在此提前谢过各位
fish100abc 2021-05-11 13:34
1)采血需要专门的医护人员进行;一般是使用EDTA抗凝管抽血后,颠倒混匀后保存;或者采用Steck抗凝管(进口),可以在常温保存7天。
2)如果是1-2天内提取DNA,可以放-4度;如果超过3天后处理,建议放-20度优艾设计网_设计保存。一般不需要使用-80度保存。
3)一般来说冻融之后可以将样本进行分装,尽量减少冻融次数;
4)可以用国产或者进口的血液提取试剂盒,这个有很多,比如QIAGEN,天根等。
5)新鲜样本提取效果最好,如果样本保存得当,冻存样本也是可以获得高质量DNA。
6)常温保存建议使用Steck抗凝管,可保存7天;低温情况下样本也建议不超过7天。
另外,如果是为了进行基因组检测,可以考虑使用唾液样本,相对来说取样方便,可短时间常温保存和运输。
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