高度保守的两个基因，如何做qPCR？？

两个高度相似的基因，需要做qPCR来看表达量，但是由于序列相似性太高，引物的设计都成优艾设计网_Photoshop论坛为了难题，该怎样解决？

---

孟宪羽 2021-06-06 03:42

优艾设计网_Photoshop交流
可以先做blast，分析出有非同源的位点，再设计引物。设计好以后再在NCBI上做个primer-blast看一下特异性。设计p16ink4a和p19arf的引物时，我先看表达这两个基因的不同exon，再在不同的exon上设计引物，得到的引物特异性就很好。

---

天下第六 2021-06-06 03:52

对于高度保守的两个基因来说肯定会有不相同的碱基，设计引物的时候将引物设计在优艾设计网_设计百科两个基因的差异序列那里，然后再进行荧光定量PCR，如果两个基因特别相近，就多设计几对引物先跑个基本的PCR，要是一条能扩增另一条不能的话估计应该能行。

---