M22****5811
2021-06-14 07:40
RPA是一种专利技术，其利用重组酶，用于扩增任何一种生物标本的核酸，具有很优艾设计网_设计客高的分析敏感性和特异性。RPA是通过反向寡聚核苷酸引物定位到模板DNA以及在DNA聚合酶的延伸，获得了特定DNA段的等温扩增。RPA的关键是动态反应环境的建立，即重组酶—引物复合体的形成和解聚达到一种动态的平衡，和PCR相比，RPA证明具有很高的粗提样品耐受性，建议可以在现场实地测试无需核酸提取时使用。
hai****sy 2021-06-14 07:52
大概看了一些文章之后发现：实际上两者之间的差别没有想象中那么大。一般，常规PCR必须经过变性、退火、延伸三个步骤，而PCR仪本质上就是一个控制温度升降的设备。RPA反应的最适温度在37°C-42°C之间，无需变性，在常温下即可进行。，也就是温度变化。
而起决定性作用的是酶，RPA技术主要依赖于三种酶：能结合单链核酸（寡核苷酸引物）的重组酶、单链DNA结合蛋白（SSB）和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性，最佳反应温度在37°C左右。
技术的原理如下：
重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物，能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就会发生链交换反应形成并启动DNA合成，对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合，防止进一步替换。在这个体系中，由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快，一般可在十分钟之优艾设计网_设计客内获得可检出水平的扩增产物。
RPA是一种专利技术，其利用重组酶，用于扩增任何一种生物标本的核酸，具有很优艾设计网_设计客高的分析敏感性和特异性。RPA是通过反向寡聚核苷酸引物定位到模板DNA以及在DNA聚合酶的延伸，获得了特定DNA段的等温扩增。RPA的关键是动态反应环境的建立，即重组酶—引物复合体的形成和解聚达到一种动态的平衡，和PCR相比，RPA证明具有很高的粗提样品耐受性，建议可以在现场实地测试无需核酸提取时使用。
hai****sy 2021-06-14 07:52
大概看了一些文章之后发现：实际上两者之间的差别没有想象中那么大。一般，常规PCR必须经过变性、退火、延伸三个步骤，而PCR仪本质上就是一个控制温度升降的设备。RPA反应的最适温度在37°C-42°C之间，无需变性，在常温下即可进行。，也就是温度变化。
而起决定性作用的是酶，RPA技术主要依赖于三种酶：能结合单链核酸（寡核苷酸引物）的重组酶、单链DNA结合蛋白（SSB）和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性，最佳反应温度在37°C左右。
技术的原理如下：
重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物，能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就会发生链交换反应形成并启动DNA合成，对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合，防止进一步替换。在这个体系中，由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快，一般可在十分钟之优艾设计网_设计客内获得可检出水平的扩增产物。
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