优艾设计网

基因工程技术中获取目的基因的方法有哪些??

优艾设计网 https://www.uibq.com 2023-01-18 08:27 出处:网络 作者:PS自学
基因工程技术首先要获取目的基因:获优艾设计网_PS百科取目的基因的途径是从生物中直接提取或人工合成,有哪些方法?_CFT****20906

基因工程技术首先要获取目的基因:获优艾设计网_PS百科取目的基因的途径是从生物中直接提取或人工合成,有哪些方法?
_CFT****20906 2021-06-29 05:22

优艾设计网_在线设计
cDNA文库,楼上都提到了,我就不说了,基本上就是PCR手段了。还有一些像是鸟枪法这个也用的很多。最最简单的就是直接分离了~


_WeCh****976714 优艾设计网_PS百科 2021-06-29 05:29


楼主说的主要是针对已知序列的基因如何获取,如果是针对针对序列未知的基因,最常用的方法是构建一个基因文库或者是cDNA文库,从中筛选出目的基因再进行克隆来得到。
构建基因文库的话,就要先把染色体DNA片段化,再选择合适的噬菌体做载体,之后将片段化的DNA与载体进行连接并包装外壳蛋白,最后用得到的重组噬菌体去感染大肠杆菌,得到的溶菌产物即为基因文库。得到的文库后期还需要进行鉴定,以便需要时可随时进行扩增。
如果是构建cDNA文库,则需要先将mRNA逆转录生成cDNA,然后再进行片段化,它和基因文库的唯一区别就是DNA来源不同,拿到DNA后的构建步骤基本一致。


离别之前的痛苦 优艾设计网_电脑技术 2021-06-29 05:30


我们所说的基因,是指mRNA,将mRNA反转录之后,得到RNA-DNA杂合cDNA双链,想得到基因,那就设计引物,从cDNA中PCR获得基因片段。
如果知识片段序列,那就直接设计引物,PCR拉出全长就可。
人工合成的话,成本太高,一般是想设计一段序列,用于以后的实验。


qkoufu510 2021-06-29 05:31

优艾设计网_PS论坛
补充一楼二楼的吧。目前获取预测基因序列的方式非常多样的。除了上面说的构建cDNA文库,还有通过转录组测序这也是一种很好的办法。方法就是提取合格的样品,然后进行测序和拼接,不过一般得到了就是unigene或者contigs,还需要按照一楼的方法进行克隆。还有就是假如你研究的某个树种的基因已经得到测序了,那么直接在数据库里搜集就可以的。


0

精彩评论

暂无评论...
验证码 换一张
取 消