纯粹路人路过
2021-08-08 03:42
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遗传疾病基因诊断技术的发展可分为以下几个阶段:第一阶段在20世纪80年代初以前,遗传疾病基因诊断主要是以DNA分子杂交方法完成,主要是RFLP方法。当突变基因座涉及酶切位点的增减时,用特定的限制酶可将DNA切成在长度上与正常基因组DNA不同的片段。这种限制酶酶切片段能以共显性的方式遗传,因而是很好的遗传标记。虽然分子杂交的检测方法可鉴定有害基因型,但往往需要大量的样品DNA,技术过程较复杂,并且探针多用同位素标记,对人体有损害。这一时期是基因检测的初级阶段,检测的遗传疾病种类较少。遗传疾病基因诊断技术发展的第二阶段是在1985年美国人Kary B. Mǜllis等创建聚合酶链反应(PCR)之后。由于PCR技术只需要简单的操作就可在普通实验条件下使所需要的靶DNA序列在短时间内得到大量扩增,从而突破了在以往研究中不易获取丰富量靶DNA的瓶颈,在分子生物学技术领域引起了一场革命。分子生物学诊断方法的第三个阶段是以基因芯片为代表的高通量密集型技术。基因芯片技术早期被称为逆向点杂交技术,是由Saiki等于1989年首次提出。基因芯片的工作原理为:如果了解了某一基因的突变情况,就可根据基因的多态性位点所对应的等位基因型,设计等位基因特异性的寡核苷酸(ASO)探针,用电脑制控的机械臂将ASO精密地排列在尼龙膜或其他固相支持物表面,然后与经过标记的DNA片段进行杂交,洗脱未结合的标记DNA片段,通过特定的显色或激光扫描,对杂交结果进行处理分析,即可检测出待测样品的基因型。
遗传疾病基因诊断技术的发展可分为以下几个阶段:第一阶段在20世纪80年代初以前,遗传疾病基因诊断主要是以DNA分子杂交方法完成,主要是RFLP方法。当突变基因座涉及酶切位点的增减时,用特定的限制酶可将DNA切成在长度上与正常基因组DNA不同的片段。这种限制酶酶切片段能以共显性的方式遗传,因而是很好的遗传标记。虽然分子杂交的检测方法可鉴定有害基因型,但往往需要大量的样品DNA,技术过程较复杂,并且探针多用同位素标记,对人体有损害。这一时期是基因检测的初级阶段,检测的遗传疾病种类较少。遗传疾病基因诊断技术发展的第二阶段是在1985年美国人Kary B. Mǜllis等创建聚合酶链反应(PCR)之后。由于PCR技术只需要简单的操作就可在普通实验条件下使所需要的靶DNA序列在短时间内得到大量扩增,从而突破了在以往研究中不易获取丰富量靶DNA的瓶颈,在分子生物学技术领域引起了一场革命。分子生物学诊断方法的第三个阶段是以基因芯片为代表的高通量密集型技术。基因芯片技术早期被称为逆向点杂交技术,是由Saiki等于1989年首次提出。基因芯片的工作原理为:如果了解了某一基因的突变情况,就可根据基因的多态性位点所对应的等位基因型,设计等位基因特异性的寡核苷酸(ASO)探针,用电脑制控的机械臂将ASO精密地排列在尼龙膜或其他固相支持物表面,然后与经过标记的DNA片段进行杂交,洗脱未结合的标记DNA片段,通过特定的显色或激光扫描,对杂交结果进行处理分析,即可检测出待测样品的基因型。
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