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有了解SNPs的基因分型方法中的单碱基延伸法的么??

优艾设计网 https://www.uibq.com 2023-02-04 17:53 出处:网络 作者:在线设计
无法显示_487 2021-08-12 08:43 单碱基延伸法基本原优艾设计网_设计客理与直接测序方法相同,从本质上讲是测SNP位点一个碱基的序列,所以也被称作Mini-Sequencing。该方法目前已经在多种仪器平台上得到应用,包括:
无法显示_487 2021-08-12 08:43


单碱基延伸法基本原优艾设计网_设计客理与直接测序方法相同,从本质上讲是测SNP位点一个碱基的序列,所以也被称作Mini-Sequencing。该方法目前已经在多种仪器平台上得到应用,包括:毛细管DNA测序仪,飞行时间质谱仪,偏振光酶标仪。该方法的优点是可以允许3-10个SNP位点在一个反应管中分型,从而降低了分析成本。缺点是实验步骤与测序一样多,在做多重分析时往往成功率降低,需要优化条件。通量是每天2万-20万个分型。


荷花桔梗在夏季 2021-08-12 08:44


楼主所说的单碱基延伸法,是ABI公司的SNaPshot方法,原理类似于Sanger测序法,我们首先通过特异性的PCR富集出包含目的SNP的目标片段,纯化完引物,单链核苷酸后,进行延伸反应,SNaPshot Kit中含有许多荧光优艾设计网_Photoshop问答标记的ddNTP,我们设计出一条紧挨着SNP位点的延伸引物,这样在反应中,他只会延伸出一个碱基(ddNTP会终止延伸反应),这样延伸出的单链核苷酸片段带有了荧光,在毛细管电泳中可以在对应的位置出现对应的颜色峰,纯合子就是一道峰,而杂合子则是两个峰。


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