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为什么Westblot显示的条带很窄??

优艾设计网 https://www.uibq.com 2023-02-23 15:26 出处:网络 作者:PS基础教程
我做wb显示的条带都很浅,为什么会这样,有人跟我一样么优艾设计网_Photoshop交流?抚松乾隆

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抚松乾隆 2021-10-12 02:18

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样品条带很浅原因很多,可能原始蛋白的浓度掌握不是很好,上样很稀这样是个很重要的原因。此外在赋予一抗的时候最好4度过夜,温度太高非特异性结合会变多,导致后期背景较黑。另外在洗涤NC膜或PVDF膜应采用PBST或TBST缓冲溶液,这样可以促进抗体和表位的特异结合。


钟琦 2021-10-12 02:25


可能因为胶凝的不均匀,聚合的不是很好,灌胶的时候尽量混匀。
可能是你样品的问题,如果盐浓度较高,便会挤压其它条带,致使条带宽窄不一,由于同样的原因,样品在凝胶中的速度会很慢,造成条带走的较慢,好像与你的预想不一致。
常见的原因是:每优艾设计网_设计客孔上样量不均匀,应确保每孔中上样量一致。
可能是系统的pH出了问题,有可能是你的电极缓冲液,也有可能是凝胶缓冲液,更新缓冲液看看,看是否能成功。


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